COOPERATION & SERVICE

RESEARCH

服务简介:

腺相关病毒(ADENO-ASSOCIATED VIRAL,AAV)属于细小病毒科,单链DNA病毒,基因组约为4.7KB。因宿主范围广,免疫原性低,表达时效长,物理性质稳定,安全性高等特点,成为世界上最常用的基因转导及基因治疗载体之一,已被广泛应用于基础研究及临床试验中。

目前,从自然界已经分离出了12种血清型的AAV。其中,从人类细胞中分离的有AAV2、AAV3、AAV5、AAV6;从非人类动物细胞中分离的有AAV1、AAV4和AAV7-AAV12。自然界中分离得到的突变型已达100多种。不同血清型AAV的衣壳蛋白识别细胞表面的受体不同,因而对不同组织细胞的感染效率相差较大,表现出一定的器官靶向特异性,利用这个特点,可以实现特点血清型AAV对特定类型细胞组织特异性的高效转导,通过人工优化,对AAV衣壳蛋白CAP基因进行定向突变改造,可筛选到具有高转导效率和不同感染特性的AAV载体,极大地增加了AAV的应用潜力。

不同血清型AAV的组织嗜亲性

不同AAV血清型对相同的组织和细胞具有不同的感染效率

* AAV-2 作为标准,感染效率为 100. ND =未检测[1]Grimm D, Lee J S, Wang L, et al. In vitro and in vivo gene therapy vector evolution via multispecies interbreeding and retargeting of adeno-associated viruses [J]. Journal of virology, 2008, 82(12): 5887-5911.

AAV制备

本公司采用优化的质粒转染法制备AAV,可提供0.1~1×1015GC(Genome copy) 滴度病毒,满足体外和体内实验需求。


AAV纯化

AAV纯化主要由超速密度梯度离心纯化以及层析纯化法。根据客户不同的使用需求,我们选用不同的方法制备出高滴度,高纯度,高质量的AAV产品。

AAV质检

  1. 滴度测定:通过qPCR的方法检测rAAV基因组的拷贝数,滴度单位是GC/ml。其中,qPCR采用的是更灵敏,高效,可靠的探针法进行,我们保证提供给客户的数据、材料真实可靠。

  2. 纯度检测:采用蛋白凝胶电泳(SDS-PAGE)采用rAAV核衣壳蛋白含量的方法。一般用百分比(%)表示。

  3. 内毒素检测:采用鲎试剂来检测或量化样品中内毒素。

AAV运输与存储

运输采用干冰运输;为避免病毒反复冻融,我公司纯化后的病毒会进行分装,收到病毒后,-80℃保存,溶解后4℃存放。

客户提供:
a. 含有目的基因的质粒:提供测序图谱;
b. 对AAV病毒的要求,包括:血清型、滴度、总量、分装量等。


最终交付:

a.纯化的病毒液;
b.质检报告:滴度检测报告,纯度检测报告及内毒素检测报告。


服务周期:

a.AAV包装质粒载体构建:5-10工作日;
b.AAV包装:15-20工作日;
c.质检:1-2工作日

沟通合作意向

如果您选择与金唯科合作,或对服务项目有疑问,可直接拨打客服热线****

项目评估报价

提供基因测序图谱,样品要求等,公司技术团队进行评估后进行报价。

合同签订

确定服务方案、报价及所有客户需求,全面保障客户的合法权益。

项目实施

金唯科拥有国际先进仪器,专业的技术团队,完善的项目管理,确保您的项目顺利实施。

项目支付

包括AAV病毒液、质检报告。使用干冰,发送快递。

售后服务

后续实验中,有任何疑问或需求,可随时与我们联系,我们会将您的项目相关记录保存半年,为您提供贴心的售后服务。